丹参质量标准及检验操作规程

标 题 文 件 号 部门审阅 批 准 颁发部门 丹参质量标准及检验操作规程 日 期 日 期 分发部门 变更记录 文件修订号 变更版本 变更时间 变更原因 起草人 QA审阅 生效日期 起草日期 日 期 共 7 页 第 1 页 1 品名： 1.1 中文名：丹参 1.2 汉语拼音：Danshen 2 代码： 3 取样文件编号： 4 检验方法文件编号：

5 依据：《中国药典》（2015年版一部）。 6 质量标准：

项目 法定标准 本品为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎。春、秋二季采挖，除去泥沙，干燥。 本品根茎短粗，顶端有时残留茎基。根数条，长圆柱形，略弯曲，有的分枝并具须状细根，长10～20cm，直径0.3～1cm。表面棕红色或暗棕红色，粗糙，具纵皱纹。老根外皮疏松，多显紫棕色，常呈鳞片状剥落。性状 质硬而脆，断面疏松，有裂隙或略平整而致密，皮部棕红色，木部灰黄色或紫褐色，导管束黄白色，呈放射状排列。气微，味微苦涩。 栽培品较粗壮，直径0.5～1.5cm。表面红棕色，具纵皱，外皮紧贴不易剥落。质坚实，断面较平整，略呈角质样。 鉴别 （1）本品粉末红棕色。石细胞类圆形、类三角形、类长方形或不规则形，也有延长呈纤维状，边缘不平整，直径14～70μm，长可达257μ同法定标准 同法定标准 内控标准 丹参质量标准及检验操作规程 （JSZL01-034-06） 第 2 页 共 7 页

m，孔沟明显，有的胞腔内含黄棕色物。木纤维多为纤维管胞，长梭形，末端斜尖或钝圆，直径12～27μm，具缘纹孔点状，纹孔斜裂缝状或十字形，孔沟稀疏。网纹导管和具缘纹孔导管直径11～60μm。 （2）取本品粉末1g，加乙醇5ml，超声处理15分钟，离心，取上清液作为供试品溶液。另取丹参对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取丹参酮ⅡA对照品、丹酚酸B对照品，加乙醇制成每1ml分别含0.5mg和1.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，使成条状，以三氯甲烷-甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（6 : 4 : 8 : 1 : 4）为展开剂，展开，展约至4cm，取出，晾干，再以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯(4 : 1)为展开剂，展开，展约8cm，取出，晾干，分别在日光及紫外光（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光色斑点。 水分 不得过13.0%（通则0832第二法）。 总灰分 不得过10.0%（通则2302）。 酸不溶液性灰分 不得过3.0%（通则2302）。 检查 重金属及有害元素 照铅、镉、砷、汞、铜测定法（通则2321原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法）测定，铅不得过5mg/kg；镉不得过0.3mg/kg；砷不得过2mg/kg；汞不得过0.2mg/kg；铜不得过20mg/kg。 二氧化硫残留量 照二氧化硫残留量测定法（通则2331）测定，不得过150mg/kg。 水溶性浸出物 照水溶性浸出物测定法（通则2201）项下的冷浸法测定，浸出物 不得少于35.0%。 醇溶性浸出物 照醇溶性浸出物测定法（通则2201）项下的热浸法测定，用乙醇作溶剂，不得少于15.0%。 丹参酮类 照高效液相色谱法（通则0512）测定。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A,以0.02%磷酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度含量测定 洗脱：柱温为20℃；检测波长270nm。理论版数按丹参酮水ⅡA 峰计算应不低于60000. 时间（分钟） 流动相A（％） 流动相B（％） 0～6 61 39 6～20 61→90 39→10

同法定标准 同法定标准 同法定标准 丹参质量标准及检验操作规程 （JSZL01-034-06） 第 3 页 共 7 页

20～20.5 90→61 10→39 20.5～25 61 39 对照品溶液的制备 取丹参酮ⅡA对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1 ml含20μg的溶液，即得。 供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率140w，频率42kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，以丹参酮ⅡA对照品为参照，以其相应的峰为S峰，计算隐丹参酮、丹参酮I的相对保留时间，其相对保留时间应在规定在值的±5%范围之内，相对保留时间及校正因子见下表； 待测定成分（峰） 相对保留时间 校正因子 隐丹参酮 0.75 1.18 丹参酮I 0.79 1.31 丹参酮 ⅡA 1.00 1.00 以丹参酮ⅡA的峰面积为对照，分别乘以校正因子，计算隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮ⅡA的含量。 本品按干燥品计算，含丹参酮ⅡA（C19H18O3）、隐丹参酮（C19H20O3）丹参酮I(C18H12O3)的总量不得少于0.25% 丹酚酸B 照高效液相色谱法（通则0512）测定。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂:以乙腈-0.1%磷酸溶液（22 : 78）为流动相；柱温为20℃：流速为每分钟1.2ml检测波长为286nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于6000. 对照品溶液的制备 取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加甲醇-水（8 : 2）混合溶液制成每1ml含0.10mg的溶液，既得。 供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约0.15g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-水（8:2）混合溶液50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率140w,频率42kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇-水（8:2）混合溶液补足减失的重量，摇匀、滤过，精密量取续滤液5ml，移至10ml量瓶中，加甲醇-水（8:2）混合溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，既得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10µl，注入液相色

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谱仪，测定，既得。 本品按干燥品计算，含丹酚酸B（C36H30O16）不得少于3.0%。 复验期 注意 贮藏 36个月。 不宜与藜芦同用。 置干燥处。 同法定标准 同法定标准 同法定标准 7 检验操作规程：

7.1 试药与试剂：乙酸乙酯、丹参对照药材、丹参酮ⅡA对照品、石油醚（30～60℃）、甲醇、丹酚酸B对照品、甲苯、三氯甲烷、甲酸、甲烷、水、乙醇、乙腈、盐酸、磷酸。

7.2 仪器与用具：水浴锅、三用紫外分析仪、恒温鼓风干燥箱、马福炉、硅胶GF254薄层板、硅胶Ｇ薄层板、原子吸收仪、高效液相色谱仪。

7.3 性状：取本品适量，自然光下目测色泽，嗅闻气味。 7.4 鉴别：

7.4.1 取本品置10×10显微镜下做显微观察。

7.4.2取本品粉末1g，加乙醇5ml，超声处理15分钟，离心，取上清液作为供试品溶液。另取丹参对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取丹参酮ⅡA对照品、丹酚酸B对照品，加乙醇制成每1ml分别含0.5mg和1.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录7）试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，使成条状，以三氯甲烷-甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（6:4:8:1:4）为展开剂，展开，展约至4cm，取出，晾干，再以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯(4:1)为展开剂，展开，展约8cm，取出，晾干，分别在日光及紫外光（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光色斑点。

7.4.3取本品粉末0.2g，加75%甲醇25ml，加热回流1小时，滤过，滤液

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浓缩至1ml，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加75%甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录7）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（2:3:4:0.5:2）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

7.5.1水分：不得过13.0％（附录15第二法）。 7.5.2总灰分：不得过10.0％（附录17）。 7.5.3酸不溶性灰分 不得过3.0％（附录17）。

7.5.4重金属及有害元素：照铅、镉、砷、汞、铜测定法（附录35原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法）测定，铅不得过5mg/kg；镉不得过0.3mg/kg；砷不得过2mg/kg；汞不得过0.2mg/kg；铜不得过20mg/kg。 8.5.5二氧化硫残留量 照二氧化硫残留量测定法（附录58）测定，不得过150mg/kg。

7.6 浸出物：

7.6.1 水溶性浸出物：照水溶性浸出物测定法（附录19）项下的冷浸法测定，不得少于35.0%。

7.6.2 醇溶性浸出物：照醇溶性浸出物测定法（附录19）项下的热浸法测定，用乙醇作溶剂，不得少于15.0%。

7.7 含量测定：

7.7.1丹参酮类 照高效液相色谱法（附录8）测定。

色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.02%磷酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱：柱温为20℃；检测波长270nm。理论版数按丹参酮水ⅡA 峰计算应不低于60000.

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时间（分钟） 流动相A（％） 流动相B（％） 0～6 61 39 6～20 61→90 39→10 20～20.5 90→61 10→39 20.5～20 61 39 对照品溶液的制备 取丹参酮ⅡA对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1 ml含20μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率140w，频率42kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，以丹参酮ⅡA对照品为参照，以其相应的峰为S峰，计算隐丹参酮、丹参酮I的相对保留时间，其相对保留时间应在规定在值的±5%范围之内，相对保留时间及校正因子见下表；

待测定成分（峰） 相对保留时间 校正因子 隐丹参酮 0.75 1.18 丹参酮I 0.79 1.31 丹参酮 ⅡA 1.00 1.00 以丹参酮ⅡA的峰面积为对照，分别乘以校正因子，计算隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮ⅡA的含量。

本品按干燥品计算，含丹参酮ⅡA（C19H18O3）、隐丹参酮（C19H20O3）丹

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参酮I(C18H12O3)的总量不得少于0.25%

7.7.2丹酚酸B 照高效液相色谱法（附录ⅥD）测定。

色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂:以乙腈-0.1%磷酸溶液（22:78）为流动相；柱温为20℃：流速为每分钟1.2ml检测波长为286nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于6000.

对照品溶液的制备 取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加甲醇-水（8:2）混合溶液制成每1ml含0.10mg的溶液，既得。

供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约0.15g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-水（8:2）混合溶液50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率140w，频率42kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇-水（8:2）混合溶液补足减失的重量，摇匀、滤过，精密量取续滤液5ml，移至10ml量瓶中，加甲醇-水（8:2）混合溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，既得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10µl，注入液相色谱仪，测定，既得。

本品按干燥品计算，含丹酚酸B（C36H30O16）不得少于3.0%。