新型功能性蜜枣对失血性贫血模型小鼠的影响
通过观察新型功能性蜜枣对失血性贫血模型小鼠的影响，探讨其保健功效。实验采用放血法造成小鼠贫血模型，以益气养血口服液为阳性对照，功能性蜜枣水提液高、低剂量组进行治疗。观察测定小鼠红细胞数、血红蛋白量、红细胞压积，计算胸腺及脾脏重量指数。实验结果显示，功能性蜜枣高剂量组能够明显升高小鼠外周血中红细胞数、血红蛋白含量、红细胞压积(p＜0.05) ，并能明显提高胸腺及脾脏重量指数(p＜0.05)。实验结果提示，功能性蜜枣尤其是高剂量(20g蜜枣/kg)可改善小鼠的贫血症状，具有补血养血作用。
标签：新型功能性蜜枣 脾脏重量指数 胸腺重量指数 外周血细胞指标。
赞皇大枣是河北著名的土特产，在赞皇已有上千年栽培历史，因其味道甘甜，鲜美可口，风味极佳，品质在大枣中名列前茅。蜜枣为赞皇最主要的大枣加工品，长期以来，蜜枣就是赞皇大枣加工的代称。但仅凭蜜枣“单打一”，无法抵御市场风险，粗放加工也严重影响了赞皇蜜枣的品质和声誉。为增强赞皇蜜枣的竞争力，急需开发营养、健康、保健的蜜枣新品。
新型功能性蜜枣是依据中医药理论组方，由大枣、山药、龙眼肉、薏苡仁、莲子、黄精、百合等多味药食两用中药为原料，结合现代绿色食品加工技术生产而来。其中，山药功偏补肾生精，益肺肾之阴；龙眼肉能够滋阴补肾、补中益气、养血安神；薏苡仁能健脾、渗湿、止泻；莲子有养心、益肾、补脾的功效；黄精可补中益气、强筋骨；百合可养阴润燥。故功能性蜜枣具有益气健脾、滋阴养血功效，具有阴阳双补的作用。本研究主要通过观察功能性蜜枣对失血性贫血模型小鼠的影响，探讨其补血养血作用，为开发新型功能性保健食品提供依据。现将研究结果总结如下。
1 材料
1.1 动物 健康雄性KM小鼠，清洁级，体重18~23g，由河北省实验动物中心提供，许可证为SCXK（冀）2008－1－003，动物饲料亦由该中心提供。
1.2 药物与试剂 功能性蜜枣由大枣、山药、龙眼肉、薏苡仁、蓮子、百合、黄精等为原料加工制得，实验时在河北医科大学中医学院中药化学实验室水提浓缩成相应浓度。益气养血口服液（10ml/支），通化茂祥制药有限公司出品，实验时用蒸馏水稀释一倍配成阳性药物溶液。
1.3 主要仪器 MB10Kpw型电子天平（上海海康电子仪器厂），JA2003 SHP07003型精密电子天平（上海恒平科学仪器有限公司），BC-2300型全自动三分群血细胞分析仪（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司）。
2 方法
2.1 分组与造模 60只健康雄性KM小鼠，体重18~23g，自由饮水进食，饲养于18℃~22℃明暗各12小时的清洁级动物实验室内，正常喂养3天。动物造模参考文献[1~3]，以75%酒精棉球擦拭小鼠尾部，使血管扩张充血，剪去鼠尾尖端0.2~0.3cm，立即采血，EDTA抗凝，测定红细胞计数（RBC）、血红蛋白含量GB）、红细胞压积（HCT）。然后将鼠尾伤口浸入装有37℃±1℃水的刻度试管中，直至小鼠失血0.5ml。失血24小时后，尾端采血测RBC、HGB、HCT。取造模成功小鼠50只，随机分成5组，每组10只，分别为空白对照组、模型对照组、功能性蜜枣低剂量组、功能性蜜枣高剂量组及阳性（益气养血口服液）对照组。
2.2 给药方法 功能性蜜枣高剂量组、低剂量组小鼠分别灌服20g蜜枣/kg体重、10g蜜枣/kg体重，给药容量为0.2ml/10g体重；阳性对照组灌服益气养血口服液稀释液0.2ml/10g体重；正常组和模型组灌服等容量蒸馏水，连续10天。
2.3 检测指标及方法
2.3.1 小鼠体重及外观形态的变化 自给药开始每天观察小鼠的精神、食欲、皮毛、眼睛、尾部及体重变化情况。记录给药前、后小鼠体重。
2.3.2 外周血细胞指标 各组小鼠末次给药前禁食18小时，正常饮水。末次给药1小时后，摘除眼球取血，通过血液分析仪检测各组小鼠红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、红细胞压积（HCT）等血液指标，并记录数据。
2.3.3 脾指数与胸腺指数 取血后，将小鼠颈椎脱臼处死，剖开腹腔，取胸腺和脾脏，分别称量胸腺和脾脏的重量，记录数据，并按下式计算胸腺指数和脾指数。
脏器指数=
2.4 统计学处理 实验数据用X±S表示，统计学处理采用spss11.0 for window统计软件。所有数据先行正态性和方差齐性检验,各组间比较采用单因素方差分析,样本均数间的两两比较采用LSD-t检验。
3 结果
3.1 对失血性贫血模型小鼠形态学的影响 正常组小鼠神气矫健，行动敏捷；皮毛光泽而密，紧贴皮肤；眼睛明亮，色泽粉红；鼻唇清洁，湿润，呈淡粉红色；尾粗、圆而呈粉红色；腰背平直，食欲正常。模型组小鼠表现出精神萎靡，倦卧少动嗜睡，皮毛蓬松枯槁；眼睛淡白无神；鼻唇淡白失泽；团缩拱背，明显消瘦；食欲下降，饮水增多，并于造模后少数出现死亡。各蜜枣组小鼠造模后出现贫血特征，其症状、体征基本同模型组，给药后程度出现减轻，而且未出现小鼠死亡现象。造模组小鼠体重低于空白对照组。给药后，模型组小鼠体重低于益气养血口服液对照组以及功能性蜜枣高、低剂量组。各组小鼠体重变化见表1。
3.2 对失血性贫血模型小鼠血细胞数的影响 造模24小时后，与空白组小鼠相比，各组小鼠外周血中RBC、HGB及HCT均显著降低，说明失血性贫血模型造模成功。给药10天后，与模型组小鼠相比，功能性蜜枣高剂量组小鼠外周血中RBC、HGB、HCT均明显升高（P＜0.05），低剂量组小鼠外周血中RBC、HGB、HCT也出现升高，说明功能性蜜枣有改善外周血指标的作用（见表2）。
与空白组比较，△△：P＜0.01；与模型组比较，*：P＜0.05。
3.3 对失血性贫血模型小鼠免疫器官的影响 功能性蜜枣高剂量组小鼠的脾重明显高于模型组（P＜0.05），脾指数较模型组也有升高趋势；功能性蜜枣高剂量组小鼠胸腺重及胸腺指数明显高于模型组（P＜0.05）。低剂量组小鼠脾重、脾指数、胸腺重及胸腺指数也高于模型组小鼠。说明功能性蜜枣有增强免疫器官重量，增强免疫功能的作用。（见表3，表4）
与模型组比较，*P＜0.05
与模型组比较，*：P＜0.05
4 讨论
河北是个农业大省，特别是西部太行山区，是生态环境的净土，有着丰富的特色农副产品资源。其中赞皇是中国大枣之乡，赞皇大枣是目前枣中唯一发现的三倍体品种。赞皇大枣产品主要有干制红枣、鲜食枣和加工品，其中蜜枣为最主要的加工品。目前，市场上蜜枣的加工多处于资源型、初级型、低端型的状况，产品单一，市场竞争力差。这个现象的背后，有着巨大的商机，那就是把赞皇大枣通过深加工，生产保健营养食品，一方面满足现代人追求高质量生活的需求，另一方面使山区农副产品的价值得以最大化的利用，造福山区群众。
本课题组依据中医药理论组方，由大枣、山药、龙眼肉、薏苡仁、莲子、黄精、百合等多味药食两用中药为原料，结合现代绿色食品加工技术制得新型功能性保健蜜枣。本研究主要通过观察新型功能性蜜枣对失血性贫血模型小鼠的影响，探讨其补血养血作用，为开发新型功能性保健食品提供依据。
实验结果表明，灌服了功能性蜜枣的高、低剂量组小鼠的状态均较造模后有明显改善，且未出现死亡情况。高剂量功能性蜜枣能明显升高失血性贫血模型小鼠的红细胞数、血红蛋白含量及红细胞压积，低剂量组小鼠的红细胞数、血红蛋白含量及红细胞压积也有升高趋势，提示功能性蜜枣具有较好的补血养血作用。
脾脏、胸腺均为人体重要的免疫器官，且脾脏具有一定的造血功能。因此，通过免疫器官重量的改变可间接评价机体造血及免疫功能的高低[4]。实验结果显示，与模型组小鼠相比，功能性蜜枣高剂量小鼠的脾重、脾指数、胸腺重及胸腺指数均显著升高，低剂量小鼠的脾重、脾指数、胸腺重及胸腺指数也有升高趋势，提示功能性蜜枣对小鼠的造血机能有一定的促进作用，还可提高免疫机能而起到强身健体的作用。
参考文献：
[1]杨丽，黄晓巍，张永和.鹿皮胶对失血性血虚动物模型的影响[J].吉林中医药，2008，28(11)：841~842.
[2]秦林，刘更生，宋月芹.试论四物汤血虚症与贫血症的关系[J].中国中医基础杂志，2004，10（2）；48～52.
[3]王建青.血虚证与贫血的关系研究[J].中国中医药信息杂志，1997，4（12）：24～25.
[4]何晓燕，李真贞.白芍对血虚小鼠补血作用的研究[J].时珍国医国药，2009，20(4)：999~1000.
