操作过程：
（一） 1、取全脑
2、在冰盘上分离海马（左右各一）和枕叶（左右各一），用滤纸吸干；
3、取其中一个海马和枕叶测蛋白、MDA和SOD，另外一个海马和枕叶放在EP管中，放入-20摄氏度的冰箱中冻存；
4、称量海马的重量放入匀浆器中加PBS匀浆，制成10%的匀浆液，（如海马重0.135g，则加PBS 135微升）
5、将匀浆液离心（4℃ 10min 10000转），取上清液。
（二） 测蛋白
1.配制BSA浓度梯度溶液：0，1，2.5，5，10（PBS配制）；
2、加2μL的样品上清液于96孔板上；
3、每孔加100μL的BCA混合液（溶液A：溶液B=50：1）；
4、于烘箱（37℃）中反应30min；
5、用酶标仪（562nm）测OD值。
（三） 测MDA
1.试剂准备
试剂一：若有凝固，适当水浴加温溶解；
试剂二：加170ml双蒸水混匀，4℃冷藏；
试剂三：粉剂，加适当双蒸水90-100℃加热，充分溶解后加水至30ml，再加30ml冰乙酸，避光冷藏；
2、配混合试剂：试剂1：试剂2：试剂3=10：150：50（注：试剂1需37℃水浴融化，实验当天配即可）；
3、取10微升样品和混合试剂200微升放入EP管中混匀；标准管和标准空白管分别加入10微升标准品和10微升乙醇；95℃加热，80min，再在流水中冷却（注意写EP管时要有3套，因为每个样品有3个平行样）；
4、离心（常温，10 min，4000转）；
5、取上清150μL，加样于96孔板上用酶标仪（532nm）测OD值；
6.MDA含量=（样品吸光度-空白管吸光度）/（标准管吸光度-空白管吸光度）*标准品浓度/蛋白含量。
（四） 测SOD（试剂盒保存期为6个月）
1.试剂制备
试剂一：储备液（5ml）加蒸馏水至50ml，4℃保存（储备液需水浴溶解后再用）；
试剂二：无需处理；
试剂三：无需处理；
试剂四：350μL的液体：5ml的4 号稀释液=1：14，根据需求配置；
试剂五：粉剂，加适当蒸馏水70℃-80℃溶解，再加水至37.5ml，避光4℃冷藏；
试剂六：粉剂，加适当蒸馏水70℃-80℃溶解，再加水至37.5ml，避光4℃冷藏；
显色剂的配制=试剂五：试剂六：冰乙酸=3:3:2，避光4℃冷藏；
2、SOD的最佳取样量是4μL；试剂4和显色剂当天配即可；
3、取上清直接加板，样品与试剂的次序
测定管 对照管
试剂1 50μL 50μL
样品 4μL
双蒸水 4μL
试剂2 5μL 5μL
试剂3 5μL 5μL
试剂4 5μL 5μL
4、将上述混合液充分混匀，置于烘箱（37℃）中，恒温反应40min；
5、加显色剂100μL（试剂5：试剂6：乙酸=3：3：2；），充分混匀后，室温放置10 min，用酶标仪（550nm）测OD值。
