中国人兽共患病学报 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａ１ ｏｆ Ｚｏｏｎｏｓｅｓ １８７ ＤＯＩ：１０．３９６９／ｃｊｚ．ｊ．ｉｓｓｎ １００２—２６９４．２０１３ ０２ ０１８ 恶性疟原虫ＡＭＡ一１基因多态性研究进展 周银发 ，张山鹰 摘 要：疟原虫裂殖子顶端膜抗原１（ＡＭＡ一１）在裂殖子晚期破裂前大量合成抗原物质，在裂殖子黏附、入侵红细胞过程中 起到重要作用。近期的研究主要通过对其进行分子生物学及免疫学进行的研究，表明ＡＭＡ一１可作为疟原虫的重要疫苗候选 抗原之一。本文介绍恶性疟原虫ＡＭＡ一１的分子结构、基因多态性的研究进展，着重分析一些有重要功能的区域片段，基因家 族的分类以及造成多态性的原因，为进一步对ＡＭＡ一１基因多态性研究提供参考。 关键词：疟原虫；ＡＭＡ一１；基因多态 中图分类号：Ｒ３８２ ３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２—２６９４（２０１３）０２—０１８７—０４ Ａｄｖａｎｃｅｓ ｏｎ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｆ ＡＭＡ－１ ｇｅｎｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｉｎ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ ＺＨＯＵ Ｙｉｎ—ｆａ ，ＺＨＡＮＧ Ｓｈａｎ—ｙｉｎｇ （１．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ，Ｆｕｊｉａｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｕｚｈｏｕ ３５０００４，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｆｕｊｉａｎ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ ａｎｄ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，Ｆｕｚｈｏｕ ３５０００４，Ｃｈｉｎａ） ＡＢＳＴＲＡＣＴ：Ｔｈｅ ａｐｉｃａｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｎｔｉｇｅｎ一１（ＡＭＡ一１）ｉｓ ｈｉｇｈｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｌａｔｅ ｓｃｈｉｚｏｎｔ ｓｔａｇｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ａｎｄ ｐｌａｙｓ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｒｏｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｍｅｒｏｚｏｉｔｅ ａｄｈｅｓｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｖａｓｉｏｎ ｏｆ ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ．Ｒｅｃｅｎｔ ｒｅｓｅａｒｃｈｅｓ ｆｏｒ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｗｅｒｅ ｃａｒｒｉｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．Ｔｈｅｓｅ ｒｅｓｅａｒｃｈｅｓ ｓｈｏｗ ｔｈａｔ ＡＭＡ一１ ｉｓ ａ ｌｅａｄｉｎｇ ｍａｌａｒｉａ ｖａｃｃｉｎｅ ｃａｎｄｉｄａｔｅ ａｎ— ｔｉｇｅｎ．Ｔｈｉｓ ａｒｔｉｃｌｅ ｇａｖｅ ａ ｄｅｔａｉｌｅｄ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ａｂｏｕｔ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｈ＇ｉｐａｒｕｍ ＡＭＡ一１ ｇｅｎｅｓ ａｎｄ ｅｍｐｈａｓｉｓｌｙ ａｎａｌｙｓｅｄ ｓｏｍｅ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｄｏｍａｉｎｓ ｏｆ ＡＭＡ一１ ｇｅｎｅ。ｇｒｏｕｐｓ ｏｆ ｇｅｎｅ ｆａｍｉｌｉｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅａｓｏｎ ｏｆ ｐｏｌ— ｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｔＯ ｐｒｏｖｉｄｅ ｔｈｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｆｕｒｔｈｅｒ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｏｆ ＡＭＡ一１ ｇｅｎｅ． ＫＥＹ ＷＯＲＤＳ：Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ；ＡＭＡ １；ｇｅｎｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｆｕｊ ｉａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ（Ｎｏ．Ｚ０５ １ ６０６ ６） Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：Ｚｈａｎｇ Ｓｈａｎ—ｙｉｎｇ，Ｅｍａｉｌ：ｚｓｙ＠ｆｊ ｃｄｃ．ｃｏｍ．ｃｎ 疟疾是一种重要的虫媒传染病，广泛流行于热 带、亚热带以及温带部分地区。由于抗药性虫株和 抗杀虫剂按蚊的出现和蔓延，传统的控疟方法效果 趋降。疫苗可能是有效的方法，所以疫苗的研发成 为控制疟疾的重要策略。裂殖子顶端膜抗原１ （ＡＭＡ一１）是恶性疟原虫的重要疫苗候选抗原之一， 和棒状体的顶端复合物上，随着裂殖体的破裂，并非 所有的ＡＭＡ一１都迁移到裂殖子表面，而是一部份 ＡＭＡ一１蛋白酶降解加工进而迁移到裂殖子表面， 另一部分未加工的ＡＭＡ一１仍处于顶端复合物 中Ｅ３］。ＡＭＡ一１这部分的酶解加工可能与裂殖体破 裂和裂殖子稳定性有关。虽然ＡＭＡ－１在疟原虫入 在入裂殖子侵红细胞过程中起着重要作用 ］。 侵人类细胞中起到重要作用，但却没有在疟原虫入 侵后形成的环状体中发现它，提示有可能ＡＭＡ一１ 只是作为一种类似信号肽的作用＿４］。ＡＭＡ一１可 能是疟原虫侵入红细胞时与红细胞膜结合的配体蛋 １ ＡＭＡ．１的分子结构及其作用 恶性疟原虫ＡＭＡ一１基因全长大约有１ ７０１ ｂｐ，编码约６００个氨基酸 。ＡＭＡ一１在裂殖子晚 白结合 。 ＡＭＡ－１蛋白是一个８３ＫＤ的完整跨膜蛋白，含 有两个疏水区域，一个是由胞质区域靠近Ｃ一末端的 ５５个氨基酸组成；第二个是由靠近Ｎ～末端的疏水 区域，可能有类似信号肽的作用。ＡＭＡ一１由３个区 域组成，分别是由２１个疏水氨基酸残基组成的跨膜 期破裂前大量合成，最早是出现于裂殖体的微线体 福建省自然科学基金计划项目（Ｎｏ．Ｚ０５１６０６６）资助 通讯作者：张山鹰，Ｅｒｎａｉｌ：ｚｓｙ＠ｆｊｃｄｃ．ｃｏｍ．ｃｎ 作者单位：１．福建医科大学公共卫生学院，福州 ３５０００４ ２．福建省疾病预防控制中心，福州 ３５０００１ １８８ 中国人兽共患病学报 —区、胞膜内的５５个氨基酸残基构成的胞内区和处于 Ｎ末端到跨膜区之间的胞外区（５４６个氨基酸残基） 组成的 。 ２１０区域；Ｈｏｎｄｅｒ则认为ＨＶＲ是属于外功能Ｉ 区的一大部分，也有认为ＨＶＲ与外功能工区只是 有重叠部分。ＨＶＲ的研究区域逐渐变大，扩大到 １３８—３０７区域ｌ＿】 ，到目前属于１４８－３３７区域＿ｌ 。 基于ＨＶＲ，Ｍａｒｓｈａｌｌ＿１ 等采用ＰＣＲ—ＲＦＬＰ方 恶性疟原虫的ＡＭＡ一１蛋白，在胞外区含有１７ 个相对保守的半胱氨酸残基，除了最Ｎ端的那个半 胱氨酸残基外，其余的１６个形成了８对分子内的二 硫键，这８个二硫键对ＡＭＡ一１蛋白的三维结构以 及因其产生的特异性免疫保护反应起到重要作用。 而且基于这些二硫键可将胞外功能区分为工、Ⅱ和 法将ＡＭＡ一１等位基因分为４个家族Ｉ、Ⅱ、Ⅲ和 １Ｖ；Ｅｉｓｅｎ［１ 等同样用该方法将恶性疟原虫的 ＫＦ１９１６分离株消化成两个次级等位基因分别属于 ｌ、Ⅱ家族；在对恶性疟原虫的非洲分离株的研究中 Ⅲ三个次级的功能区，分别含有３对，２对和３对二 硫键 。 ３个区域均是抑制性抗体的目标区域，所以外 功能区的多态性对疫苗抗原的组成有很大的影响。 有很多研究都针对该区域进行分析，其中很多研究 都表明在外功能区甚至ＡＭＡ—ｌ全长中工区是最具 有多态性的，而Ⅱ区就相对比较保守一点ｌ８州，但也 有研究表示在Ⅱ区具有最多的氨基酸替代，表明Ⅱ 区可能是最具多态性的一个区域［２Ｊ。虽然只有较少 的突变发生在Ⅲ区，但是潜在的多态性也可能造成 疟原虫逃脱抗体的作用。３个区域之间有着相互的 作用，这相互作用是否对疫苗的发展有用还需进一 步研究。 ２ ＡＭＡ．１基因多态性研究 ２．１Ｂ Ｔ细胞抗原表位多态性 Ｂ Ｔ细胞抗原表位 在ＡＭＡ—ｌ致免疫过程中起到重要作用，其抗原多 态性在对疫苗的抗原成分有很大的影响。在ＡＭＡ— ｌ上有９个具有致免疫Ｂ Ｔ细胞抗原表位，其中有５ 个Ｂ细胞抗原表位和４个Ｔ细胞抗原表位，对这些 表位均具有多态性，且除了胞质尾区的５７１—５８８残 基上的一个Ｔ细胞抗原表位外其他均是非同义突 变数量多于同义突变ｌ８ ；Ｒａｊｅｓｈ［ 等同样也对印度 分离株该９个抗原表位中的８个分析发现比以往的 报告中的结果更具有多态性而且还发现一些新的突 变；Ｃｈｅｎｅｔ＿ｌ 等在恶性疟原虫秘鲁分离株的两个致 免疫的Ｂ Ｔ细胞抗原表位的（２５９—２７１）和（２７９—２８７） 区域内发现在２６７位点（Ｇｌｕ—Ｇｌｎ）和２８２位点（Ｉｌｅ— Ｌｙｓ）有两个均是非同义突变。 ２．２等位基因家族分类 ＡＭＡ一１基因编码的蛋 白质，它的氨基酸替代呈簇状，聚集在成熟的ＡＭＡ一 １的第１个和第８个半胱氨酸之间（１４８—３３７残基 位置）Ｍａｒｓｈａｌｌ口 等发现５３个突变位点中有２４个 （４５Ｖ０）处于该区域，该区域就是所谓的ＡＭＡ一１的 高度可变区域（ＨＶＲ）。ＨＶＲ最早是由Ｔｈｏｍａｓ等 提出的位于ＡＭＡ一１基因编码的蛋白质氨基酸１６０ 也只发现有属于前三个家族的等位基因作者认为第 四个家族的等位基因并不存在于非洲ｌ＿１ ，在秘鲁的 分离株中发现３个家族［１ ，在印度分离株中只发现 ２个家族ｕ 。 但是也有对ＡＭＡ一１的完整序列数据分析却不 能将等位基因划分成几个家族，认为基因家族分类 使用于一些特殊情况如一些本身就已经有明显的分 组的等位基因如ＭＳＰ一１和ＭＳＰ一２基因等。因为 ＰＣＲ—ＲＦＬＰ方法适用于严格的突变位点，而对于 ＡＭＡ－１散在的点突变并不适合口 。ＲａｊｅｓｈＥ 在研 究中也发现如果按Ｍａｒｓｈａｌｌ的等位基因家族分类 法，有两个等位基因不属于任何一个家族。因此这 种采用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法对ＡＭＡ一１等位基因进行 分类的方法还需要进一步的研究。 ２．３ ＡＭＡ一１基因在地域上的差异 对ＡＭＡ一１基 因在地域上的差异的研究可以帮助我们了解虫株的 进化衍生，而地域上的差异对于疫苗的研发推广是 一种很重要的障碍。 ２．３．１ 对亚洲地区进行的研究 ２００７年Ｇａｒｇｓ等 对印度的５个地区１５７例分离株分析其中有４４个 位点具有多态性产生了５７种不同的单倍型，只有 ３１种是单个拷贝，其中４６种单倍型是以前没有报 道过的，且每个地区存在的单倍型都不一样，在疟疾 高流行区域Ｉ区多态性程度要比低疟区来的高。整 个Ｉ区的１５２个密码子２９个突变位点中有１７个位 点是三态的，３个位点是四态的，１个是五态的，其中 １３个多态位点具有特定区域的多态性 ］。２００８年 Ｒａｊｅｓｈｌ２ 等对印度的拉贾斯坦和孟加拉省的１３例 恶性疟原虫分离株序列分析结果与原型等位基因 ３Ｄ７和ＦＣ２７比较，发现有１６１个突变位点，其中 １３１个是非同义突变；５４个是发生在密码子的第一 个碱基，４９个发生在第二个碱基上，５８个发生在第 三个碱基上，改变了ＡＭＡ—ｌ蛋白氨基酸从而导致 多态性的发生，氨基酸改变数量要比２００１年Ｅｓ— ｃａｌａｎｔ＿８ 等对印度（德里）的分离株研究发现的５４个 氨基酸改变要多５３个，并且在１０７个氨基酸改变中 ２期 周银发等：恶性疟原虫ＡＭＡ一１基因多态性研究进展 １８９ 有３２个位于Ⅱ区，这与Ｒａｊｅｓｈ等在２００７年对间日 疟原虫研究发现的结果相似，Ｇｕｎａｓｅｋｅｒａ也发现在 间日疟中有大部分单核苷酸多态位点聚集在Ⅱ区。 Ｑｕａｎｇ＿ｌ 等对越南（Ｂａｏ Ｌｏｃ）的恶性疟原虫分 离株进行序列分析，分析的３１个序列中有２５个单 ２．４．１ 由自然选择引起的 在对ＡＭＡ一１突变位 点分析中发现非同义突变率比同义突变率高是自然 选择的结果，从而产生基因多态性。张龙兴等＿１ 对 云南勐捧分离株分析发现非同义突变比同义突变率 高，且有１４个密码子的突变均造成氨基酸的取代， 一倍型，大部分单倍型只有一个，有４个单倍型两个拷 贝，只有一个是三个拷贝，有３７个多态位点，４０个 核苷酸多态位点，有三个多态位点是三态型，只有一 些取代还呈多发趋势反映了恶性疟原虫ＡＭＡ一１ 在选择压力下的进化现象；Ｏｌｉｖｅｉｒａ等＿１ 认为非同 义的碱基突变引起氨基酸替代的趋势也表明了基因 个核苷酸多态是由同义突变引起的，在该地区的 正经历着选择的压力；Ｅｓｃｌａｎｔｅ等＿８ 研究分析发现 ＡＭＡ—ｌ基因核苷酸多态性程度要比尼日利亚、泰 ＡＭＡ一１的致免疫区域在选择的压力下产生高的多 国和斯里兰卡这些疟疾流行区域要来的高。 态性；Ｒａｊｅｓｈ等ｌ＿２］对恶性疟原虫的印度分离株也发 单志新等＿】 ］对恶性疟原虫海南（ＦＣＣ１／ＨＮ）株 现了ｄＮ／ｄＳ＞１认为自然的选择是造成ＡＭＡ一１多 ＡＭＡ—ｌ基因进行序列分析和同源性比较，与其他 态性的主要原因；Ｃｈｅｎｅｔ等＿】叩不仅在（２５９—２７１） 分离株相比并无长度多态性，与Ｔｈａｉ—Ｔｎ和ＨＢ３株 Ｒ１和（２７９—２８７）Ｒ２区域还在其他区域发现多态性 的同源性较高，而与张龙兴等＿ｌ 报道的云南勐捧 位点的突变都是非同义突变居多，他们认为正是由 ＣＭＰ１株差异较大，可能与恶性疟原虫ＦＣＣｌ／ＨＮ 于该基因在特异性免疫反应的选择压力下产生的非 株与ＣＭＰ１株存在地理隔离，彼此进化有关。 同义突变；Ｕｍａｒ Ｆａｒｏｏｐ等ｌ＿】 ］采用ＰＣＲ—ＲＦＬＰ方 张龙兴等对云南勐捧ＣＭＰ１株序列分析与参照序 法未发现有次一级的等位基因从而无法进行基因家 列比较，有１７个突变位点引起１５个密码子的变异， 族的分类可能由于多态性存在自然选择的原因； 造成ｌ４个氨基酸的取代。ＨＡＮ等口。］在南韩在出 Ｃｏｌｅｙ等ｌ＿２０＿也发现免疫反应的选择压力对ＡＭＡ一１ 现的间日疟原虫分析发现ＡＭＡ一１的两个基因型与 分子多态性起到很重要的作用。 中国的基因型相似，推断这些重现的疟疾可能起源 ２．４．２ 由基因内重组引起的 基因内重组在 于中国或其他亚洲有出现类似该基因型的地区。 ＭＳＰ一１和ＭＳＰ一２中已被认为是产生基因多态性的 ２．３．２在对非洲以及南美洲人地区的研究：Ｃｈｅｎｅｔ 一个机制，可能也是ＡＭＡ一１基因多态性的一个原 等在对秘鲁亚马逊流域的１３９例分离株研究发现的 因。而重组参数（Ｒｍ与Ｒ）被认为可以用来估计是 恶性疟原虫多态在其他南美洲地区均可发现，越早 否有重组的存在。Ｅｉｓｅｎｌ＿１ 等采用ＰＣＲ—ＲＦＬＰ方法 收集的分离株的基因多态性越高，有三个等位基因 对巴布亚新几内亚的恶性疟原虫的ＫＦ１９１６株分析 型３Ｄ７、ｐｅｒｕｌ和７ＧＢ，其中３Ｄ７出现的频率最高， 发现有属于工和Ⅱ两个家族的次级等位基因，提示 在全部的Ｄ工区域中发现有２４个多态位点，其中只 有基因内重组现象的存在。但该发现也仅限于在 有一个是发生同义替代。 ＨＶＲ上的严格的位点上进行，然而Ｅｓｃａｌａｎｔｅ等 Ｓｏｕｌａｍａ等Ｅ 在对恶性疟原虫非洲的分离株 用Ｒｍ与ＳＳＣＦ测量方法均未发现有基因内重组的 进行序列分析发现有三个等位基因型（Ｋ１、ＨＢ３和 存在。在理论上，当由于基因内重组造成等位基因 ３Ｄ７），其中３Ｄ７的比例在非洲的东西中部存在差异 多态性时，在多态位点之间的基因连锁不平衡程度 （Ｐ＜Ｏ．０５）。Ｅｓｃｌａｎｔｅ等在研究中发现位于非洲的 就会下降；所以当我们用重组参数来估计基因内重 肯亚分离株ＡＭＡ一１基因是最具多态性，其多态位 组是还要考虑两个连锁不平衡的指数（Ｄ’和 点要比东南亚多２Ｏ ，比委瑞内拉多３０ 。作者推 Ｒ。）［１ 。因此基因内重组是否是造成ＡＭＡ一１基因 断造成非洲地区的ＡＭＡ一１多态性程度比其他地区 多态性的主要原因还需进一步研究分析。 来的高有两个主要原因：一是由于选择压力和地区 ２．４．３ 由二者共同作用引起的Ｇａｒｇ＿８ 等研究的结 的种群大小不同；二是由于恶性疟原虫是发源于非 果也阐明了ＡＭＡ一１的外功能Ｉ区的多态性是由于 洲然后在东南亚衍生，而在南美州则遭遇在衍生殖 正向自然选择导致的，但是重组参数（Ｒｍ和Ｒ）都 民化进程中的瓶颈＿８ 。 很高说明了该区的一些多态位点可能有基因内重组 ２．４ 造成ＡＭＡ一１基因多态性的原因 造成恶性 的存在。也对恶性疟原虫越南分离株研究中也发现 疟原虫ＡＭＡ一１基因多态性原因，认为主要有三种： ｄＮ／ｄＳ＞１的同时Ｒｍ值也比较高。这些都说明了 一是由于自然选择引起；二是由于基因内重组产生 有可能ＡＭＡ一１基因多态性可能就是由于二者共同 的；再则就是由于二者共同的作用下造成。 作用下引起的。 １９０ 中国人兽共患病学报 ２０１３，２９（２） ３存在问题 ＡＭＡ—ｌ作为一种重要的疟疾疫苗候选抗原， 虽然对它的研究已取得很大的进展，但是仍有一些 许多问题，例如： ３．１ 在ＡＭＡ一１内的的１６个保守的半胱氨酸残 基，在分子内形成８个二硫键对疟原虫的ＡＭＡ一１ 蛋白的稳定性具有重要的作用。而半胱氨酸残基的 多态性对ＡＭＡ一１成为疟疾疫苗候选抗原的影响还 需进一步的探讨。 ３．２ 在一些研究中还发现了ＡＭＡ一１在表达过程 中由于突变而出现提前终止的现象¨２］，这种现象对 恶性疟原虫的生活史以及进化的影响，亦需进一步 的分析。 ３．３ ＡＭＡ一１是恶性疟原虫最重要的疫苗候选抗 原之一，但是由于等位基因的多态性而造成一些抗 原表位的多态性，这些多态性阻碍了基于该抗原的 疫苗研发，所以如何去寻找到有效的合适的抗原表 位来研发广谱而有效的疫苗仍是个关键问题。 参考文献： ［１］Ｐｅｔｅｒｓｏｎ ＭＧ，Ｍａｒｓｈａｌｌ ＶＭ，Ｓｍｙｔｈｅ ＪＡ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｔｅｇｒａｌ ｍｅｍ— ｂｒａｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｌｏｃａｔｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ａｐｉｃａｌ ｃｏｍｐｌｅｘ ｏｆ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉ ｐａｒｕｍ ＥＪ］．Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｅ，１９８９，９（７）：３１５１－３１５４． ［２］Ｒａｊｅｓｈ Ｖ，Ｓｉｎｇａｍｓｅｔｔｉ ＶＫ，Ｖｉｄｙａ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｌｃｉ— ｐａｒｕｍ：ｇｅｎｅｔｉｃ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｉｎ ａｐｉｃａｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｎｔｉｇｅｎ １ ｇｅｎｅ ｆｒｏｍ Ｉｎｄｉａｎ ｉｓｏｌａｔｅｓ［Ｊ］．Ｅｘｐ Ｐａｒａｓｉｔｏｌ，２００８，１１９：１４４ １５１． Ｄ（）Ｉ：１０．１０１６／ｊ．ｅｘｐｐａｒａ．２００８．０１．０１９ Ｌ３Ｊ Ｎａｒｕｍ ＤＩ ，Ｔｈｏｍａｓ ＡＷ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｕｌｌｌｅｎｇｔｈ ａｎｄ ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ ｆｏｒｍｓ ｏｆ Ｐｆ８３／ＡＭＡ １ ａｎ ａｐｉｃａｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｎｔｉ— ｇｅｎ ｏｆ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ知ｌｃｉｐａｒｕｍ ｍｅｒｏｚｏｉｔｅｓ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｐａｒａｓｉｔｏｌ，１９９４，６７（１）：５９－６８．ＤＯＩ：１０．１０１６／０１６６－６８５１（９４） ９００９６—５ ［４］Ｆａｎｇ ｚ．Ｙｕ ＸＢ．Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｎ ａｐｉｃａｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｎｔｉｇｅｎ ｏｆ Ｐｌａｓｒｎｏｄｉｕｍ ｍｅｒｏｚｏｉｔｅ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ Ｊ Ｐａｒａｓｉｔ Ｄｉｓ Ｃｔｒｌ，１ ９９９，１２ （１）：６３－６５．（ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ） 方政，余新炳．疟原虫裂殖子顶端膜抗原研究进展［Ｊ］．中国寄生 虫病防治杂志，ｌ９９９，ｌ２（１）：６３—６５． Ｅ５］ｕｒｉｑｕｉｚａ Ｍ，Ｓｕａｒｅｚ ＪＥ，Ｃａｒｄｅｎａｓ ｃ，ｅｔ ａ１．Ｐｌａｓｒｎｏｄｉｕｍ ｌｃｉ— ｐａｒｕｍ ＡＭＡ一１ ｅｒｔｈｒｏｃｙｔｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｉｍｐｌｉｃａｔｅ ＡＭＡ—Ｉ ａｓ ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ＥＪ］．Ｖａｃｃｉｎｅ，２０００，ｌ９（４／５）：５０８— ５１３．ＤＯＩ：１０．１０１６／Ｓ０２６４ ４１ＯＸ（００）００１８５—７ Ｅ６３Ｎｉｅ ＢＹ，Ｚｈａｎｇ ＬＸ．Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｒｎ ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ ＡＭＡ一１ ｐｏｌｙｍｏｒ— ｐｈｉｓｍ ａｎｄ ｉｔｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｉｎ ｖａｃｃｉｎｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｍｅｄ Ｐａｒａｓｉｔ Ｄｉｓ，２００ｌ，２８（４）：１５６－１５９．（ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ） 聂本勇，张龙兴．恶性疟原虫ＡＭＡ一１多态性及其在疫苗研制中 的意义［Ｊ］．国外医学寄生虫分册，２００１，２８（４）：１ ５６ １５９． ｒ７］Ｈｏｗｅｌｌ ＳＡ，Ｗｉｔｈｅｒｓ—ｍａｒｔｉｎｅｚ Ｃ，Ｋｏｃｋｅｎ ＣＨ，ｅｔ ａ１．Ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ａｎｄ ｐｒｉｍａｒｙ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ ａｐ— ｉｃａＩ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｎｔｉｇｅｎ １［Ｊ］．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ，２００１，２７６（３３）： ３１ ３１１—３Ｉ３２０．ＤＯＩ：１０．１０７４／Ｉｂｃ．Ｍ１０３０７６２００ ［８］Ｅｓｃａｌａｎｔｅ ＡＡ，Ｇｒｅｂｅｒｔ ＨＭ，Ｃｈａｉｙａｒｏｊ ＳＣ，ｅｔ ａ１．Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｉｎ ｔｈｅ ｇｅｎｅ ｅｎｃｏｄｉｎｇ ｔｈｅ ａｐｉｃａｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｎｔｉｇｅｎ ｌ（ＡＭＡ一１）ｏｆ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ．Ｘ．Ａｓｅｍｂｏ Ｂａｙ Ｃｏｈｏｒｔ Ｐｒｏｊｅｃｔ［Ｊ］． Ｍｏｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｐａｒａｓｉｔｏｌ，２００１，１１３（２）：２７９—２８７．ＤＯＩ：１０．１０１６／ ＳＯｌ６６—６８５ｌ（０１）００２２９—８ ［９］Ｏａｒｇ Ｓ，Ａｌａｍ ＭＴ，Ｄａｓ ＭＫ，ｅｔ ａ１．Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎｄ ｎａｔｕ— ｒａｌ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ａｔ ｄｏｍａｉｎ Ｉ ｏｆ ｔｈｅ ａｐｉｃａ１ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｎｔｉｇｅｎ １ ａｍｏｎｇ Ｉｎｄｉａｎ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｕｒｎ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｍａｌａｒ Ｊ，２００７， ６：１５４．Ｄ０ｌ：１０．１１８６／１４７５ ２８７５－６—１５４ ｒ１０］Ｃｈｅｎｅｔ ＳＭ，Ｂｒａｎｃｈ ＯＨ，Ｅｓｃａｌａｎｔｅ ＡＡ，ｅｔ ａ１．Ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉ ｔｙ ｏｆ ｖａｃｃｉｎｅ ｃａｎｄｉｄａｔｅ ａｎｔｉｇｅｎｓ ｉｎ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ ｉｓｏ— ｌａｔｅ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ａｍａｚｏｎ ｂａｓｉｎ ｏｆ Ｐｅｒｕ［Ｊ］．Ｍａｌａｒ Ｊ，２００８，７：９３． ＤＯＩ：１０．１ １８６／１４７５－２８７５－７—９３ ［１１］Ｍａｒｓｈａｌｌ ＶＭ，Ｚｈａｎｇ ＬＸ，Ｒｏｂｉｎ Ｆ，ｅｔ ａ１．Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｖａｃ ｃｉｎｅ ｃａｎｄｉｄａｔｅ ＡＭＡ一１ ｏｆ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ Ｊｈｌｃｉｐａｒｕｍ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｐａｒａｓｉｔｏｌ，１９９６，７７（１）：１Ｏ９—１１３．ＤＯＩ：１０．１０ｌ６／ ０ｌ６６—６８５ｌ（９６）０２５８３—２ ［１２２Ｅｉｓｅｎ ＤＰ，Ｍａｒｓｈａｌｌ ＶＭ，Ｂｉｌｌｍａｎ—Ｊａｃｏｂｅ Ｈ，ｅｔ ａ１．Ａ Ｐｌａｓｍｏ— ｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ ａｐｉｃａｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｎｔｉｇｅｎ一１（ＡＭＡ １）ｇｅｎｅ ａｐｐａｒｅｎｔｌｙ ｇｅｎｅｒａｔｅｄ ｂｙ ｉｎｔｒａｇｅｎｉｃ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｂｉｏ— ｃｈｅｍ Ｐａｒａｓｉｔｏｌ，１９９９，１００（２）：２４３ ２４６．ＤＯＩ：１０．１０１６／ｓｏ１６６— ６８５１（９９）０００５４ ７ ［１３］Ｓｏｕｌａｍａ Ｉ，Ｂｉｇｏｇａ ＪＤ，Ｎｄｉａｙｅ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ｖａｃｃｉｎｅ ｃａｎｄｉｄａｔｅ ａｎｔｉｇｅｎｓ（ａｐｉｃａｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｎｔｉ ｇｅｎ一１，ｍｅｒｉｏｚｏｉｔｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｐｒｏｔｅｉｎ一３ ａｎｄ ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｎ— ｔｉｇｅｎ １７５）ｉｎ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｉｐａｒｕｍ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ Ｗｅｓｔｅｒｎ ａｎｄ Ｃｅｎｔｒａｌ Ａｆｒｉｃａ［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｔｒｏｐ Ｍｅｄ Ｈｙｇ，２０１１，８４（２）： ２７６—２８４．Ｄ（ｊＩ：１０．４２６９／ａｉｔｍｈ．２０１１．１０—０３６５ Ｌｌ４Ｊ Ｆａｒｏｏｑ Ｕ，Ｍａｌｌａ Ｎ，Ｄｏｂｅｙ ＭＩ 。Ｇｅｎｅｔｉｃ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｉｎ ＭＳＰ一２，ＡＭＡ一１ ａｎｄ ＣＳＰ ｇｅｎｅｓ ｉｎ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｌｃｉｐａｒｕｍ ｆｉｅｌｄ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ ｎｏｒｔｈ ａｎｄ ｎｏｒｔｈ—ｗｅｓｔｅｒｎ Ｉｎｄｉａ［Ｊ］．Ｊ Ｖｅｃｔｏｒ Ｂｏｒｎｅ Ｄｉｓ，２００９，４６（２）：１０９－１１６． ［１５］Ｑｕａｎｇ ＮＤ，Ｈｏａ ＰＴ，Ｔｕａｎ ＭＳ，ｅｔ ａ１．Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ａｔ ｔｈｅ ａｐ— ｉｃａｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｎｔｉｇｅｎ １ ｇｅｎｅ（ＡＭＡ１）ｏｆ ｔｈｅ ｍａｌａｒｉａ Ｐｌａｓｍｏ— ｄｉｕｍ ｌｃｉｐａｒｕｍ ｉｎ ａ Ｖｉｅｔｎａｍｅｓｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｇｅｎ— ｅｔ，２００９，４７（５－６）：３７０—３８４．ＤＯＩ：１０．１ＯＯ７／ｓｌＯ５２８一ＯＯ９－９２３６－４ ［１６］Ｓｈａｎ ＺＸ，Ｙｕ ＸＢ，Ｉ ｉ ＸＲ，ｅｔ ａ１．Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＡＭＡ １ ａｎｄ Ｐｆｓ２３０ ｇｅｎｅ ｏｆ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ｛ｕｌｃｉｐａｒｕｍ ｉｓｏｌａｔｅ ＦＣＣ１／ＨＮ ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ Ｊ Ｚｏｏｎｏｓｅｓ，２００２，１８（５）：１９—２４．（ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ） 单志新，余新炳，李学荣，等．恶性疟原虫海南株ＡＭＡ ｌ， ｐｆｓ２３０基因的序列分析［Ｊ］．中国人兽共患病杂志，２００２，１８（５）： １９—２４． ［１７］Ｚｈａｎｇ Ｉ ｘ，Ｚｈａｎ Ｂ，Ｗａｎｇ ＪＪ，ｅｔ ａ１．Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ａｐｉｃａｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｎｔｉｇｅｎ Ｉ ｆｒｏｍ ａ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ ｉｓｏｌａｔｅ ｃｏｌ— ｌｅｔｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｍｅｎｇｐｅｎｇ Ｔｏｗｎｓｈｉｐ，Ｙｕｎｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ Ｊ Ｐａｒａｓｉｔｏ１ Ｐａｒａｓｉｔｉｃ Ｄｉｓ，１９９５，１３（３）：２０３—２０８．（ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ） 张龙兴，詹斌，王聚君，等．恶性疟原虫云南勐捧分离株裂殖子 顶端膜抗原１序列分析［Ｊ］．中国寄生虫学与寄生虫病杂志， １９９５，１３（３）：２０３－２０８． ［１８］Ｈａｎ ＥＴ，Ｐａｒｋ ＪＨ，Ｓｈｉｎ ＥＨ，ｅｔ ａ１．Ａｐｉｃａｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｎｔｉｇｅｎ—ｌ （ＡＭＡ １）ｇｅｎｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｒｅ—ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕ ｖｉｖａｘ ｉｎ Ｓｏｕｔｈ Ｋｏｒｅａ［Ｊ］．Ｋｏｒｅａｎ Ｊ Ｐａｒａｓｉｔｏｌ，２００２，４０（３）：１５７—１６２． ＤＯＩ：１０．３３４７／ｋｊｐ．２００２．４０．３．１ ５７ ［１９］Ｏｌｉｖｅｉｒａ ＤＡ，Ｕｄｈａｙａｋｕｍａｒ Ｖ，Ｂｌｏｌａｎｄ Ｐ，ｅｔ ａ１．Ｇｅｎｅｔｉｃ ｃｏｎ— ｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ｝ｕｌｃｉｐａｒｕｍ ａｐｉｃａｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｎｔｉ— ｇｅｎ一１（ＡＭＡ一１）［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｐａｒａｓｉｔｏｌ，１９９６，７６（１－２）： ３３３—３３６． ［２０］Ｃｏｌｅｙ ＡＭ，Ｐａｒｉｓｉ Ｋ，Ｍａｓｃｉａｎｔｏｎｉｏ Ｒ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｐｏｌｙ— ｍｏｒｐｈｉｃ ｒｅｓｉｄｕｅ ｏｎ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｈ ｉｐａｒｕｍ ａｐｉｃａｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｎｔｉｇｅｎ—ｌ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｓ ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ ａｎ ｉｎｖａｔｉｏｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ａｎｔｉｂｏｄｙ ［Ｊ］．Ｉｎｆｅｃｔ ｌｍｍｕｎ，２００６，７４（５）：２６２８—２６３６．ＤＯＩ：１０．１１２８／ ＩＡＩ．７４．５．２６２８—２６３６．２００６ 收稿日期：２０１２－０５—２２；修回日期：２Ｏ１２ ０８—１６
